實驗前準(zhǔn)備要點：

1. 準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標(biāo)儀、高速離心機、高精度加樣器及槍頭等等）

2. 按照生物實驗室安全防護(hù)條例，穿著實驗服并佩戴乳膠手套做好防護(hù)工作

3. 使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4. 嚴(yán)格按照說明書的操作方法進(jìn)行操作。說明書以英文說明書為準(zhǔn)。

我司ELISA檢測試劑盒分為96T和48T兩種規(guī)格。96T試劑盒可檢測90個樣，48T試劑盒可檢測42個樣。

科研專用豬輪狀病毒(PoRV)ELISA檢測試劑盒檢測原理：試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被豬輪狀病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測抗原，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中豬輪狀病毒（RV）的存在與否。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

科研專用豬輪狀病毒(PoRV)ELISA檢測試劑盒組成：

上海軒澤康生物部分合作單位：
河南中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、同濟(jì)大學(xué)、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、仁濟(jì)醫(yī)院、曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院、華中科技大學(xué)、重慶大學(xué)、四川大學(xué)華西醫(yī)院、華南理工大學(xué)、杭州市腫瘤醫(yī)院等

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